Detektálás

• Detektálás


  Felismerés, észrevétel. Bizonyos anyagok önmagukban detektálhatók(natív). Akkor az eredetit a minta jelölése, festése, módosítása nélkül. Pl fehérjék ~280 nm, nukleinsavak a purinbázisok miatt, más fluoreszcens metabolitok NAD, NADP
• Detektor által mérhető impulzusok


  Elektromágneses hullámok pl röntgensugárzás, rádióhullámok. Radioaktivitás pl izotópókkal. Elektromos jelet vagy változást az elektromos térben pl vezetőképesség, elektromos potenciál
• Jelölés


  Nem natív formában detektáljuk a kompnenst. Nem szelektív jelölők: minden vegyületcsoporthoz kötődik, teljes molekulát jelöl. Szelektív jelölők: vegyületcsoport néhány vagy csak egy tagjához, specifikusan. Legszelektívebb az immunjelölés antitestekkel.
• immunjelölés


  Az antitest 1 darab szekvenciához kötődik, nagy affinitással és specificitással kötődik a molekula felszínéhez. Van direkt és indirekt jelölés, ahol egy másodlagos antitest van.
• Radioaktív izotópok


  Nem stabil atommagok bomlása miatt. Alpha: He atommag, béta: elektronsugárzás, gamma: elektromágneses sugárzás.
• Radioaktivitás detektálása a molekuláris

  biológiában

  PET, MRI, részecskedetektorok erőművekben
• Radioaktív jelölés és sűrűségjelölés


  A jelölő molekulához, azon kivül is köthetünk radiaktív anyagot vagy radioaktív molekulákat magába a vizsgálandó anyagba.
• Nem-radioaktív izotóp jelölés


  Itt lehet alkalmazni a szeparációs technikát. Ez a DNS replikációjának módja
• Meselson-Stahl kísérlet


  Konzervatív: minden generációban megmarad a szülői szál és nem keveredik. Szemikonzervatív: szétválnak és így szintetizálnak. Diszperzív: szegmenseke vállnak szét
• Lumineszcencia


  Fényt bármilyen formában tudnak detektálni. Alacsony hőmérsékletű testek fénykibocsátása. Kiváltó oka lehet: kémia reakció,

  mechanikai behatás, szubatomi

  események, stb. Példa: Kemilumineszcencia, Fotolumineszcencia, Radiolumineszcencia.
• Nukleinsavak nem specifikus jelölése

  Vagy nem specifikus jelölőkkel a teljes

  nukleinsavmennyiség detektálhatóvá tehető. Kötődhetnek molekulák a DNS kis, vagy nagy árkához
• Nukleinsavak jelölése specifikusan:

  szekvencia specifikus próbák


  FISH in situ hibridizáció. A próbák komplementerei a DNS szálnak és így bázispárosodás

  • A próba DNS darabot jelölni tudjuk

  • általában fluoreszcens, vagy radioaktív módon
• Vezetőképességmérés

  Oldatok koncentrációjának meghatározására

  használták. Az ionok mozgása befolyásolja a vezetőképességet. első sejtszámlálásra alkalmas

  készülék