Enzyme qui catalyse la réaction de polymérisation du brin d’ARNm : ARN polymérase
Initiation :
ARN polymérase va reconnaître un site spécifique : promoteur et elle va s’y fixer
ARN polymérase va sé parer les brins d’ADN pour former une bulle de transcription
fin de l’initiation lorsque les 2 premiers ribonucléotides forment une liaison phosphodiester
Élongation :
polymérase avance dans le sens 3’ vers 5’ du brin matrice ainsi , elle ouvre l’ADN double brin et re associe les brins derrières elle
ribonucléotides sont ajouter un par un à partir de l’extrémité 3’ de la chaîne d’ARN en cours de synthèse
Terminaison :
molécule terminé d’ARN est libéré de l’ARN polymérase
ARN polymérase se dissocie de la matrice
ARN polymérase est libre de transcrire une nouvelle fois le gène ou un autre gène
ARN Polymérase chez les procaryotes :
une seule ARN polymérase ADN-dépendante
composée de 5 sous unités
5 sous unités :
bêta
bêta prime
alpha
alpha
gamma
Bêta prime : comporte le site actif de l’enzyme
Bêta : impliquée dans la synthèse de l’ARN
Alpha : deux domaines et permet l’assemblage de l’ARN polymérase
+ interaction non spécifique avec le promoteur
Gamma : permet de stabiliser l’enzyme
+ assemblage des sous unités
Chez les procaryotes : ARN polymérase est incapable d’initier la transcription seule elle a besoin d’une autre protéine : facteur sigma
Facteur sigma : protéine qui permet la liaison spécifique avec le promoteur chez les procaryotes
Chez les procaryotes : complexe fermé : fixation ARN polymérase sur le promoteur avec l’aide du facteur sigma
Complexe ouvert : séparation des deux brins d’ADN
Facteur sigma bloque le canal de sortie de l’ARN polymérase ce qui forme une courte séquence : «transcrits abortifs » (initiation)
Facteur sigma libéré lors de l’élongation ce qui permet à l’ARN polymérase de se déplacer sur le brin matrice + synthèse du brin complémentaire orienté dans le sens 5’ vers 3’
Deux types de terminaisons chez les procaryotes :
rho indépendante
rho dépendante
Rho indépendante :
pas besoin de protéines externes
repose sur des terminateur intrinsèques
conduit au décrochage de l’ARN du complexe de transcription
terminateur intrinsèques :
éléments présents dans la séquence du gène qui permettent de donner un signal d‘arrêt de transcription à l’ARN polymérase
deux éléments de séquences (terminateur intrinsèques)
séquence répétée inversée
séquence riche en thymine sur le brin codant de l’ADN
Séquence répétée inversée :
forme une structure en épingle à cheveux lorsque c’est transcrit en ARN
cause l’arrêt de l’ARN polymérase
T en U ce qui forme des liaisons faibles avec A
Rho dépendante :
besoin d’une protéine : protéine rho
rho dépendante : besoin d’une protéine
Protéine rho : protéine héxamérique :
6 sous sous unités
activité hélicase ( peut séparer 2 brins d’acides nucléiques)
besoin d’énergie (ATP)
reconnaît des sites riches en C
Utilisation de l’ATP (rho dépendant) par la protéine pour se déplacer le long de l’ARN jusqu’à l’hybride ADN ARN
permet de séparer les brins ARN du brin matrice d’ADN matrice