Génétique

• Acides nucléiques

  ADN & ARN : Chaînes d'ac. nucléiques

  Mlc chargées d'informations
• Compo. des nucléoSIDES

  Une base azotée & une sucre (=pentose)
• Compo. des nucléoTIDEs

  Une base azotée, un pentose & un groupement phosphate
• Les bases azotées

  Guanine & Adénine : Purines

  Cytosine & Thymine/Uracile (pour l'ARN) : Pyrimidines
• Guanine


  Purine

  
• Adénine


  Purine

  
• Cytosine


  Pyrimidine

  
• Thymine


  Pyrimidine

  Uniquement présent dans l'ADN

  
• Uracile


  Pyrimidine

  Uniquement dans l'ARN

  
• Pentose des ARN


  beta- Ribose

  
• Pentose des ADN


  beta- 2'- Désoxyribose

  
• Propriétés des bases azotées

  Mlc planes

  Bcp de doubles liaisons et de liaisons conjuguées

  Prop. d'absorption à certaines longueur d'ondes
• Liaison entre le ribose & une base

  β-N-osidique
• Liaison entre un désoxyribose & une base

  β-N-osidique
• Génome humain haploïde


  $3,1*$$10^9 pb$
• L'ADN est une mlc bicaténaire faites de 2 chaînes d'ADN monocaténaires
• Les 2 chaînes sont dites antiparallèles & complémentaires :

  A avec T/U

  C avec G
• Orientation des chaînes

  5' -> 3'

  De la gauche vers la droite
• Intéractions entre les bases


  Etablissment de liaisons H

  Entre T/U & A : 2 liaisons H

  Entre C&G : 3 liaisons H ( + stable )
• Structure secondaire de l'ADN


  Double hélice

  Bases perpendiculaires à l'axe

  Pas = 3,4 nm = 10 pb
• Compléter le schéma

  A) Petit sillon

  B) Grand sillon

  
• Chromato d'affinité


  Séparation de mlc par leurs prop. physico-chimique dans un système ayant une phase stationnaire (= solide) & une phase mobile (=liquide)
• Charge de l'ADN

  négatif du au grp phosphate
• λmax de l'ADN dicaténaire

  λ= 260nm
• λmax de l'ADN monocaténaire


  λ= 260nm

  MAIS, son spectre est 1,4x plus fort que celui de l'ADN bicaténaire
• Compléter le schéma

  1 = ADN dénaturé

  2 = ADN bicaténaire

  A) ADN dénaturé

  B) ADN bicaténaire

  
• Mesure à 280 nm permet :

  • détection de l'ADN
  • Mesure de quantité d'ADN dans un éch.
  • Mesure de pureté/protéine
  • Détection une/plusieurs séq. d'ADN
• Abs max des protéines

  λ= 280nm
• Bonne pureté par rapport aux protéines

  $260nm/280nm > 1,8$
• Tm = Température de dénaturation


  Température à laquelle on obtient 50% de quantité d'ADN dénaturé dans un éch.
• Dénaturation de l'ADN

  = Déshybridation = fusion

  L'augmentation de la T°C entraîne un fort mouvement Brownien & casse les liaisons H entre les bases