Klausur alt

• Identische DNA Verdopplung ist das wesentliche Merkmal der DNA Replikation
• Die DNA synthese verläuft...

  • bidirektional
  • semikonservativ
  • diskontinuierlich
• Beim Meselson Stahl Experiment

  Bakterien wurden in einem Medium mit schwerem Stickstoff (15N) kultiviert, dann in ein Medium mit leichtem Stickstoff (14N) überführt. Durch Dichtegradientenzentrifugation wurde die DNA analysiert.

  In der Ausgangskultur hatte man nur schwere Bakterien

  In der ersten Generation hatte man halbschwere Bakterien

  In der zweiten Generation hatte man sowohl halbschwere als auch leichte Bakterien zu gleichen Anteilen. Mit weiteren Generation ging der Anteil der leichten Bakterien hoch.

  Die semikonservative Repikation wurde bestätigt
• Die B-DNA ist...

  • rechtsgängig
  • besteht aus zwei antiparallelen Strängen
  • eine vollständige Windung hat eine höhe von 3,4 nm
  • eine Windung enthält 10 bp
  • der durchmesser beträgt 2,0 nm
  • im Inneren der Helix liegen Stickstoffbasen
  • zwischen A und T werden 2 H-Brücken ausgebildet
• Die DNA Replikation des E. Coli Genoms erfolgt stets bidirektional
• Die Replikation beginnt stets am OriC
• Es sind stets zwei Replikationsgabeln vorhanden
• Währen der Replikation ist die eines sogenannten theta-Intermediat zu beobachten
• Die DNA-Polymerase 1 und 3 realisieren die Replikation des bakteriellen Genoms
• Die DNA-Polymerase 3 synthetisiert DNA in 5'-3' Richtung
• Die DNA-Polymerase 3 benötigt eine Matrize
• Zur Initiation der Replikation benötigt die DNA-Polymerase 3 ein Stück Doppelstrang (DNA/DNA)
• Für die DNA-Synthese benötigt die DNA-Polymerase 3 ein freies 3'-OH-Ende
• Die DNA-Polymerase 3 besitzt 5'-3'-Polymerase Aktivität
• Die DNA-Pol 3 besitzt 3'-5'-Exonuclease Aktivität
• Für die Initiation der Replikation von E. coli werden die Komponenten:

  • DnaA-ATP
  • DnaB
  • DnaC gebraucht
• Die Komponenten des Replikationsapparates bei Prokaryoten sind:

  • DnaA
  • DNA Helicase
  • Primase
  • DNA-Polymerase 3
  • DNA-Polymerase 1
  • Ligase
  • SSB-Proteine
  • Topoisomerase
• Problem bei der eukaryotischen Replikation:

  Da die DNA linear ist können die Lücken am Ende der Stränge nach entfernen des Primers nicht einfach verschlossen werden, da nicht das benötigte 3'-OH-Ende vorhanden ist.
• Die Telomerase...

  • fügt am Ende eine kurze Wiederholungssequenz von 5' nach 3' ein
  • enthält selbst ein Stück RNA
• Das Holoenzym der RNA-Polymerase von E. coli besteht aus:

  • Pol-3-Kernenzym
  • sliding clamp
  • Klammerlader/clamp loader
• In Eukaryoten realisieren 3 RNA-Polymerasen die Transkription:

  • RNA-Pol-1 --> 18S, 28S rRNA
  • RNA-Pol-2 --> mRNA
  • RNA-Pol-3 --> tRNA
• Bei der eukaryotischen Transkription finden folgende posttranskriptionale Modifikationen statt:

  • Polyadenylierung am 3'-Ende
  • Die Guanyltransferase fügt Guanin an das 5' Ende
  • Introns werden durch das Spleißen entfernt