Mikroteknik 2

• Macam dan Jenis Metode pembuatan preparat

  • Metode apus/oles (smear preparation)
  • Metode rentang (spread preparation)
  • Preparat maserasi hewan
  • Metode supravital (sediaan segar)
  • Preparat berdasarkan utuh tidaknya preparat
  • Preparat berdasarkan cara/teknik pengirisan preparat
• Suatu pembuatan sediaan dengan jalan mengoles/membuat selaput (film) dari substansi yang berupa cairan diatas gelas benda untuk selanjutnya kemudian difiksasi, diwarnai (pewarnaan Giemsa) dan ditutup dg gelas penutup, ex: darah, cairan nanah, sumsumn tulang
• Metode apus/oles (smear preparation)

  1. Darah diambil dan diteteskan pada gelas benda

  2. Dibuat apusa darah dg cara menempelkan bagian tepi gelas benda lain yg membentuk sudut ± 45º lalu didorong sehingga terbentuk film darah yang tipis dan rata

  3. Preparat dikeringanginkan dan difixir dg alkohol 95% selama 30 menit

  4. Pewarnaan dg Giemsa selama 30-45 menit, dicuci, dikeringkan
• Suatu metode pembuatan sediaan dg cara merentangkan suatu jaringan pada permukaan gelas benda sedemikian sehingga dapat diamati dibawah mikroskop, ex: jaringanyang tipis: pleura, mesenterium, peritoneum, pericardium dll
• Biasanya dg pewarnaan Mallory Triple Stain
• Preparat maserasi hewan


  1. Potongan tulang dimaserasi (direndam) dalam air 2 x 24 jam

  2. Keringkan dalam oven

  3. Potong dengan gergaji halus (membujur)

  4. Tempelkan pada kayu

  5. Gosok pada batu pengasah atau amplas halus sampai tipis

  6. Tempel pada gelas obyek
• Suatu metode untuk mendapatkan sediaan dari sel atau jaringan hidup
• Biasanya dg zat warna: Janus green, neutral red, Methylen blue
• Whole Mount Embrio ayam

  1. Telur diteropong untuk melihat posisi titik embrio

  2. Tandai bagian yang berembrio dengan pensil

  3. Telur diinkubasi di dalam inkubator pada suhu 36°C selama 24, 36, dan 48 jam

  4. Teropong telur untuk melihat apakah embrio berkembang

  5. Gunting cangkang pada bagian yang telah ditandai

  6. Tempelkan cincin kertas saring mengelilingi embrio

  7. Gunting selaput embrio di sekeliling luar cincin kertas saring

  8. Angkat embrio dengan pinset

  9. Cuci dengan garam fisiologis

  10. Fiksasi dengan larutan Bouine selama 30 menit

  11. Cuci dengan etanol 70%

  12. Warnai dengan eosin 1% dalam etanol 70% selama 5 menit

  13. Cuci dengan etanol 70%, dehidrasi dengan etanol 80%, 95%, dan 100% selama masing-masing 10 menit

  14. Jernihkan dengan xilol selama 2 x 10 menit
• Deparafinisasi


  Proses menghilangkan parafin dari preparat
• Staining jar


  Wadah untuk mewarnai preparat
• Dehidrasi


  Proses menghilangkan air dari preparat
• Hasil akhir sediaan histologik

  Preparat yang siap diamati di bawah mikroskop
• Ditanyakan : alkohol 50% sebanyak 200 ml
• Perhitungan pembuatan larutan alkohol 50% dari alkohol 70%


  1. V1.M1=V2.M2

  2. V1. 70% = 200ml x 50%

  3. V1= 200x 50%/70%= 142,85 ml 70%

  4. Aquades = 200-142,85= 57,15 ml