Aula 01

• O corpo humano possui aproximadamente 10 trilhões de células
• O corpo humano possui aproximadamente 200 tipos de células
• Células possuem compartimentos bem definidos em organelas e depósitos
• Quais os tipos de proteção em um ambiente laboratorial?

  Equipamentos de proteção individual (EPIs) e equipamentos de proteção coletiva (EPCs).
• Qual a importância do cultivo de células em vitro?

  Pesquisa, impressão de órgãos 3D, organóides, modelos de doenças etc.
• Qual o primeiro passo para isolar uma célula?

  Realizar a digestão celular com enzimas
• O que mantém as células de um tecido unidas?

  Forças de ligação gerada por proteínas
• Após a digestão, a separação dos tipos celulares pode ser feita por centrifugação, filtração, MACS, FACS, etc.
• A sepração por MACs separa os tipos celulares por meio de anticorpos magnéticos que se ligam às células de interesse
• A sepração MACS separa apenas um tipo de célula de interesse
• A sepração FACs separa as células por meio de anticorpos com marcadores fluorescentes que se ligam às células de interesse
• Na separação FACs, os marcadores ligados são identificados por um laser e separadas por um campo elétrico
• A separação FACs consegue separar mais de um tipo de célula de interesse
• O cultivo de células in vitro é feita em meios de cultura, que são soluções de agentes que promovem a proliferação celular
• Uma vantagem do cultivo de células em vitro é a redução do uso de animais em experimentos
• Cada tipo celular requer um meio de cultura diferente
• Transwell é o cultivo misto de células onde as células estão no mesmo ambiente, mas sem contato direto
• Uma cultura de células primárias é uma cultura onde as células foram obtidas diretamente do tecido/órgão original
• Uma cultura de células secundárias são células provenientes de uma cultura de células primárias
• Uma desvantagem da cultura de células secundária é o envelhecimento das células
• Uma linhagem celular contínua é uma cultura celular "imortalizada" com crescimento descontrolado
• Uma linhagem de células contínua é geralmente obtida de células de câncer ou vírus
• Uma vantagem das células "imortalizadas" é o baixo custo e uma desvantagem é a perda das características da célula original
• HIbridomas são células híbridas geradas a partir da fusão de células produtoras de anticorpos animais com vírus
• A função dos hibridomas é a prodção de anticorpos em larga escala
• Proteínas são compostas por 20 tipos diferentes de aminoácidos
• O que a imagem representa?

  O dogma central da biologia molecular

  
• O isolamento de organelas e componentes celulares é geralmente feito por centrifugação
• No método de separação celular por centrifugação, quanto maior a velocidade da centrífuga, menor o componente passível de ser separado
• A cromatografia é um método de separação de substâncias em uma amostra, e pode ser dividida em plana ou em colunas
• A cromatografia em colunas é baseado na velocidade de cada molécula pela coluna de separação
• A cromatografia de coluna pode ser de troca iônica, de filtração em gel ou de afinidade
• Na cromatografia de filtração em gel, as moléculas maiores passam primeiro pela coluna
• Eletroforese é uma técnica que permite a separação de proteínas, DNA e RNA de acordo com o tamanho, forma e carga elétrica
• Na eletroforese, a amostra é colocada em um gel poroso e é aplicada uma diferença de potencial que faz as células migrarem
• Para fazer a eletroforese é necessário quebrar as estruturas terciária e quaternária das proteínas
• Na eletroforese, a quebra da estrutura das proteínas é feita com um detergente SDS, que deixa as proteínas carregadas negativamente
• Na eletroforese, as proteínas tratadas com SDS se movem pelo gel por meio de uma diferença de potencial, se movendo para o ânodo
• Na eletroforese, proteínas maiores se locomovem de forma mais lenta
• Western Blot é um método feito após a eletroforese onde a proteína é exposta a um anticorpo, permitindo encontrar uma proteína de interesse