antigen je substance, která provokuje protilátky k vazbě
pokud je antigen kompletní označuje se jako imunogen
Immunochemical methods
RIA
ELISA
WB
Imunodifuze
Imunoprecipitace
Imunohistologie
hapten
nekompletní antigen
musí být navázán na nosič -> nestimuluje vazbu protilátek
Coupling - vazba haptenu na nosič -> kompletní hapten
Precipitace
vzniká nerozpustný komplex
Aglutinace
shlukování protilátek a antigenů
faktory ovlivňující vazbu Ag-Ab
Teplota
pH
iontovásíla
Extreme pH can denature antibody or antigen molecules or both
Struktura epitopů
proteinové - tvořeny sekvencemi aminokyselin
polysacharidové - tvořen jednotky sacharidů
nukleové kyseliny - tvořen bázemi nukleových kyselin
typy epitopů
sekvenční
konformační
Determinanty
Části molekuly antigenu, které rozpoznává imunitní systém a váží se na ně protilátky
Typy antigenních determinant
Sekvenční
Konformační
Sekvenční determinanta
Určena posloupností základních jednotek, např. aminokyselin, sacharidů, nukleotidů
Na prostorové konformaci nezáleží
Konformační determinanta
Na posloupnosti základních jednotek příliš nezáleží
Důležitá je prostorová konformace determinanty – pokud nebude mít určitý tvar, daná protilátka se nenaváže
Denaturace (teplo, redukční činidla)
Změní se prostorová struktura konformační determinanty, protilátka se nenaváže, změní se specifičnost
Sekvence sekvenční determinanty se nezmění, žádný vliv
Sekvenční determinanta
Může se stát hapteny po odštěpení z nosiče
Konformační determinanta
Je trvalou součástí nosiče
Velikost sekvenční determinanty
Trimer až oktamer, např. 3 – 8 aminokyselin, sacharidů apod.
Velikost konformační determinanty
Obvykle větší než sekvenční, většinou do 20 jednotek (aminokyselin, cukrů…), patří zde nativní proteiny s různou sekundární a terciální strukturou, desítky až stovky kDa
Denaturace konformační determinanty
Protilátky se na denaturovaný antigen nevážou
Denaturace sekvenční determinanty
Protilátky se vážou i na denaturovaný antigen – sice byla porušena konformační struktura, ale sekvence se nezměnila
Sekvenčně homologní (podobné) proteiny mohou vyvolat křížové reakce protilátek
Protilátka proti lysozymu reaguje jen s lysozymem, protilátka proti lactalbuminu reaguje pouze s laclabuminem
Typy antigenních determinant
Volné (imunopotentní)
Zakryté
Volná antigenní determinanta
V komplexu s vhodným nosičem stimulují tvorbu protilátek
Zakrytá antigenní determinanta
Pro lymfocyty nejsou „viditelné", takže se netvoří protilátky
Lze vyřešit chemicky – enzymové nebo chemické štěpení (BrCN) dojde k odštěpení určité skupiny a odhalení vhodné determinanty
Imunopotentnost
Schopnost určité části molekuly antigenu sloužit jako antigenní determinanta a vyvolat tvorbu protilátek
Rozdělení antigenů podle původu
Přirozené
Syntetické
Artificiální
Rozdělení antigenů podle vztahu k určitému organismu
Exogenní
Endogenní
Příklady přirozených exogenních antigenů člověka
Antigeny hmyzu (roztoči, domácí prach, alergická onemocnění)
Antigeny vyšších rostlin (pylové antigeny, alergická onemocnění)
Složení včelího jedu obsahuje antigeny a pro některé osoby i alergeny
Příklady endogenních antigenů člověka
Antigeny rakovinových buněk
Příklady endogenních antigenů člověka - autoimunitní choroby
Diabetes I. typu
Roztroušenáskleróza
Hemolytická choroba novorozenců
Mateřské IgG proti Rh+ pronikají skrz placentu a mohou poškodit plod
Anti-D imunoglobulin obsahuje specifické protilátky (IgG) proti D(Rh) antigenu lidských erytrocytů
Význam darování krve: úrazy, havárie, nemoci, operace
Konjugace haptenů se využívá v přípravě kompletních imunogenů