Colture Cellulari

• Tipi di mezzo di coltura basale


  • Eagle's MEM
  • Media 199
  • Ham's
  • DMEM (più usato)
• Sali inorganici


  Servono per mantenere la pressione osmotica (stato isotonico) regolando il potenziale di membrana
• Indicatore di pH (Rosso Fenolo)

  Mantiene il pH attorno a quello del sangue quindi 7.4
• Tampone bicarbonato


  Mantiene il pH con uso di CO2 proveniente dall'esterno
• Tampone HEPES


  Forte tampone chimico che porta il pH da 7.2 a 7.6 senza uso di Co2
• Carboidrati (Glucosio e Galattosio)

  Fonte energetica in una concentrazione che va da 1g/L a 4.5g/L
• Supplementi


  Non si trovano all'interno del mezzo ma vengono aggiunti dopo
• Componenti del siero


  • Proteine: Albumina, Globulina e Trasferina
  • Fattori e ormoni di crescita: ECGF, VEGF, bFGF e a FGF,IGF, IL-2, GMCSF e CSF, EGF e HGF
  • Ormoni
  • Metaboliti
  • Nutrienti
  • Minerali
  • Inibitori
• Vitamine contenute nel mezzo di coltura di base


  Vitamina B, Biotina, Riboflavina, Tiamina
• Chetoacidi contenuti nel mezzo di coltura di base

  Assalacetato e Piruvato
• Tamponi pH contenuti nel mezzo di coltura di base


  Tampone bicarbonato e HEPES
• Sali inorganici contenuti nel mezzo di coltura di base


  Na+, K+, Ca2+
• Componenti del mezzo di coltura di base

  • Sali inorganici (Na+, K+ e Ca2+)
  • Ioni per l'attacco cellulare e per gli enzimi cofattori
  • Indicatore di pH (Rosso Fenolo)
  • Tamponi (Tampone bicarbonato e Tampone HEPES)
  • Carboidrati (Glucosio e Galattosio)
  • Vitamine (B per proliferazione, biotina, riboflavina e tiamina)
  • Tracce di elementi (Zinco, Rame, Selenio e intermediari di acidi carbossilici)
  • Chetoacidi (Piruvato e ossalacetato)
• Acquisizione di cellule immortali

  1. Prelevate direttamente dal tessuto tumorale

  2. Trasformate tramite l'utilizzo di plasmidi con oncogeni o dei virus (es: SW40)