Pruebas bioquímicas

• • Medio de cultivo: RM-VP
  • Sustrato: Glucosa Glucólisis—>ácido pirúvico—>ácidos mixtos
  • Producto ácidos mixtos (< pH 4.4)
  • Revelador: Rojo de metilo
• Pruebas de rojo de metilo

  • Medio de cultivo: RM-VP
  • Sustrato: Glucosa Glucólisis—>ácido pirúvico—>ácidos mixtos
  • Producto ácidos mixtos (< pH 4.4)
  • Revelador: Rojo de metilo
• Prueba de Voges Proskauer

  • Medio de cultivo: RM-VP
  • Sustrato:Glucosa Ac. Pirúvico—>fermentación

  butilen glicólica

  • Productos: acetoina o acetil-metil-carbinol y butilenglicol pH 6.2
  • Reveladores: alfa-naftol y KOH 40 %
• Pruebas de Kliger 


  Medio de cultivo

  • Glucosa 1.0 g

  • Lactosa 10.0g

  • Peptona especial

  • Rojo de fenol

  • Citrato férrico de amonio

  • Tiosulfato de sodio

  • Agar

  • pH 7.4 ± 0.2

  • Fermentación de glucosa

  • Fermentación de lactosa

  • Producción de gas

  • Detección de ácido sulfhídrico
• Caldo rojo de fenol + carbohidratos 


  Medio base rojo de fenol.

  • Sustrato: carbohidrato

  • Enzima: enzimas de la glucólisis o pentosa fosfato

  • Indicador pH: rojo de fenol

  • pH acido (positivo)

  • pH neutro

  • pH alcalino (negativo)
• Utilización del citrato 


  Medio de cultivo: Citrato de Simmons

  • Sustrato: Citrato de sodio

  • Enzimas: Citrato

  permeasa, ciclo de krebs.

  • Productos: (NH4)2CO2

  • Indicador de pH

  • pH Azul de bromotimol (disminuye)

  • pH Azul de bromotimol (negativo)

  • pH Azul de bromotimol (aumento , positivo)
• Prueba de la oxidasa

  • Sustrato: N,N,N,N-tetrametil-p-fe nilendiamina reducido (incoloro)
  • Enzima: citocromo oxidasa c
  • Producto: N,N,N,N-tetrametil-p-fe nilendiamina oxidada (azul)
• Prueba de la catalasa

  • Medio de cultivo:No hay un medio de cultivo específico para la prueba de catalasa; se puede realizar directamente sobre colonias bacterianas cultivadas en cualquier medio de crecimiento adecuado, como agar nutritivo o agar sangre.
  • Sustrato: Peróxido de hidrógeno (H₂O₂).
  • Producto: Agua (H₂O) y oxígeno gaseoso (O₂).
  • Revelador: El propio sustrato, peróxido de hidrógeno, actúa como revelador. La reacción produce burbujas de oxígeno, indicando un resultado positivo.
• Prueba de oxidación y fermentación 


  • Objetivo

  Conocer la vía metabólica que utiliza el microorganismo para la degradación de carbohidratos.

  Medio de cultivo:O/F

  • Sustrato: carbohidrato

  • Enzimas: degradación oxidativa o fermentativa

  • Producto: ácidos

  • Indicador: azul de bromotimol
• Medio O/F


  • Triptona

  • Cloruro de sodio 5.0 g

  • K2HPO4 0.3 g

  • Azul de bromotimol

  • Agar 2.0 g

  • Carbohidrato de interés 10 %
• Medio SIM

  • Peptona de caseína

  • Peptona de carne

  • Sulfato de hierro y amonio

  • Tiosulfato de sodio

  • Agar 0.35 %

  • pH 7.3 ±0.2
• Detección de ácido sulfhidrico

  • Sustrato aminoacidos azufrados, tiosulfato, sulfatos.

  • Enzima: sulfato reductasa

  • Producto: H2S • Revelador Fe2+

  • coloracion: negro para positivo
• detección de índol

  • Medio de cultivo: SIM

  • Sustrato: triptófano

  • Enzima: triptofanasa

  • Producto: Indol + ac. pirúvico

  • Revelador: Reactivo de Kovac o Ehrlich (p-fenilendiamina en HCl)

  • coloración: rosa-fuccia (positivo)
• Movilidad 


  Medio de cultivo: SIM
• Reducción de nitratos

  • Medio de cultivo: caldo nitrato

  • Sustrato: nitrato de

  sodio

  • Enzima: nitrato reductasa

  • Productos: nitritos, NO, N2O N2

  • Reveladores:

  α-naftil-amina y ácido sulfanílico

  • Positivos: rojo - naranja
  • negativos: color de caldo