Analitical Chemistry

• Continguts


  • Introducció
  • Fonaments de cromatografia
  • Cromatografia de Gasos (GC)
  • Aplicacions de la GC
  • Cromatografia Líquida (HPLC)
  • Aplicacions de la HPLC
• Fase estacionària


  • Sòlid (cromatografia d'adsorció)
  • Gel (cromatografia d'exclusió)
  • Resina (cromatografia d'intercanvi iònic)
  • Líquid (cromatografia de partició)
• Cromatografia d'intercanvi iònic


  Tècnica de cromatografia líquida
• Cromatografia d'intercanvi iònic + conductivitat
• HPLC


  High-Pressure Liquid Chromatography: Fase líquida introduïda a pressió, millors separacions, instrumentació més complicada
• Cromatografia de partició


  Fase estacionària: líquid polar, Fase mòbil: líquid apolar (partició fase normal)

  Fase estacionària: líquid apolar, Fase mòbil: líquid polar (partició fase inversa)

  
• Les separacions són més efectives quan la fase estacionària i la fase mòbil tenen una polaritat més diferent
• Els analits han de ser solubles en la fase mòbil
• El següent cromatograma mostra la separació de: 1: naftalè; 2: fluorantè; 3: acenaftè; 4: fluorè; 5: benzopirè; 6: antracè
• Columna: C-18 (30 cm x 4 mm), Fase mòbil: metanol / aigua (90:10), Detector: UV (λ = 254 nm)
• Es podria millorar el cromatograma
• Detectors HPLC


  Absorció UV-VIS, Fluorescència UV-VIS, Conductimètric, Índex de refracció
• Detector d'índex de refracció (límit de detecció 1-10 ppm)
• Aplicacions de la HPLC

  • Mètodes establerts
  • CL partició + UV visible
  • Mescla d'aminoàcids (Fase Normal, UV-VIS, Fluorescència)
  • Mescla d'HAPs (CL partició fase normal + UV)
  • Mescla de catequines (Analits Polars, FE Polar, FM Apolar)
• En la figura es mostra el cromatograma obtingut en la separació de ciclohexà, ciclohexanol i ciclohexanona (no apareix el pic del traçador) utilitzant HPLC amb una fase estacionària de NH2 i una fase mòbil de CCl4 (índex de polaritat 4.6)
• Traçador en cromatografia


  Compost afegit a la mostra per identificar pics
• El cromatograma obtingut mostra els pics de benzè, toluè i anilina
• Es vol analitzar separadament aspirina, cafeïna i salicilamida mitjançant HPLC amb fase estacionària C18 i fase mòbil 15% d'acetonitril en aigua
• Es vol analitzar cromatogràficament una mescla de toluè, benzè i hexà en una mostra biològica utilitzant fase estacionària C18 i fase mòbil 15% d'acetonitril en aigua