8

• Krevní obraz (KO)


  Vyšetření patřící mezi základní laboratorní vyšetření

  
• Krevní obraz


  • Počet krevních částic měříme na hematologických analyzátorech
  • Používá se nesrážlivá krev (zkumavka s K3EDTA = sůl kyseliny etylendiaminotetraoctové)

  
• Hematologické analyzátory


  • Analyzátory krevních částic (analyzátory KO)
  • Vydávají rychle a přesně informace o počtech erytrocytů, leukocytů a trombocytů a další odvozené parametry
  • Krevní obraz s pětipopulačním diferenciálním rozpočtem leukocytů patří k základnímu vyšetření u řady onemocnění
  • Analyzátor upozorňuje na patologie v krevním obraze - v tom případě nutno provést nátěr na sklíčko a zkontrolovat mikroskopicky

  
• Parametry měřené přímo hematologickými analyzátory

  • RBC, Hb, RDW, MCV, retikulocyty, WBC, dif pětipopulační, PLT, MPV

  
• Parametry zjištěné výpočtem z hodnot měřených parametrů

  • MCH, MCHC, PDW, PCT
• Hct/Ht


  Lze měřit přímo nebo výpočtem (HcT= RBC x MCV)
• Parametry červených krvinek a jejich význam

  • RBC (Red Blood Cells) - počet erytrocytů v 1 litru krve
  • Hb (Hemoglobin) - koncentrace červeného krevního barviva v g/l krve - hlavní parametr pro anemii v praxi - je směrodatný pro transport kyslíku
  • HCT ev. Ht (Hematokrit) - poměr objemu erytrocytů z celkového objemu krve
  • MCV (Mean Cell Volume) - střední objem erytrocytu - průměrný objem buňky v hodnocených erytrocytech
  • MCHC (Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) - střední koncentrace hemoglobinu v erytrocytech = množství Hb v erytrocytární mase
  • MCH (Mean Corpuscular Hemoglobin) - barvivo v erytrocytu = množství hemoglobinu v 1 erytrocytu
  • RDW (Red cell Distribution Width) - erytrocytární křivka = šíře nejčetnějších populací erytrocytů v histogramu RBC podle MCV

  
• Parametry KO - trombocyty

  • PLT (Platelets) - počet trombocytů v 1 litru krve
  • MPV (Mean Platelet Volume) - střední objem destičky
  • PDW (Platelet Distribution Width) - šíře distribuce destiček
  • Pct (Plateletcrite) - destičkový hematokrit
  • IPF - (Immature platelet fraction)-frakce nezralých trombocyt
• Diferenciální rozpočet leukocytů periferní krve

  1. Moderní hematologické analyzátory krevního obrazu provádí automatické stanovení pětipolulačního diferenciálního rozpočtu leukocytů

  2. Využívají k tomu optickou analýzu založenou na prozáření buňky laserovým paprskem

  3. Díky analýze procházejícího a rozptýleného světla je možno detekovat velikost a tvar buňky i jádra a granularitu cytoplazmy

  4. U některých přístrojů je průtoková cytometrie doplněna o imunochemické barvení buněk

  5. Rozložení jednotlivých subpopulací leukocytů je zobrazeno v tzv. scattegramu

  6. Na přítomnost ev. patologie nás upozorní nejen atypické rozložení populací ve scattergramu, ale také číselné parametry a odchylky v histogramech

  7. Na základě všech těchto dat z analyzátoru je při podezření na přítomnost nezralých nebo atypických buněk nutno provést mikroskopické stanovení dif. rozpočtu a zhodocení morfologických odchylek leukocytů, erytrocytů i trombocytů

  
• Mikroskopický diferenciální rozpočet


  1. Periferní krev – zhotovení nátěru

  2. Panoptické barvení

  3. Hodnocení 100 leukocytů

  4. Hodnocení morfologických změn leuko, ery, trombo

  
• Mikroskopický nález v periferní krvi za fyziologických okolností

  • Erytrocyty
  • Granulocytární segmenty ev. tyče (neutrofilní, eosinofilní, bazofilní)
  • Lymfocyty
  • Monocyty
  • Trombocyty

  
• DM - digitální morfologie

  • Součástí některých analyzátorů je nátěrový a barvící automat
  • Takovéto nátěry je pak možno hodnotit v zařízení pro digitální zpracování obrazu pod dohledem laboranta
  • Moderní metoda analýzy diferenciálního rozpočtu leukocytů
  • Digitální zpracování fotografií buněk krevního nátěru a počítačové vyhodnocení výsledků
  • Světelný mikroskop pomocí digitálního fotoaparátu naskenuje předem zvolený počet buněk v nátěru (100,200…)
  • Následně buňky zařadí do jednotlivých leukocytárních subpopulací pomocí softwaru, který je porovnává s referenčními buňkami v databázi
  • Analýza jednoho nátěru trvá cca 2 minuty
  • Obsluha přístroje kontroluje zařazení jednotlivých buněk