25

• Získané inhibitory


  Protilátky se objevují v důsledku různých onemocnění (nádorová onemocnění, záněty), v těhotenství, mohou být vyvolané léky, ale někdy se objevují bez zjistitelné příčiny
• Odlišovat od přirozených inhibitorů krevního srážení (APC, AT, TAFI…)
• Laboratorní zjištění


  • Prodloužení časů koagulačních testů
  • Snížení aktivity či koncentrace faktorů
  • Snížení či porušení funkce trombocytů
• Základní typy protilátek/inhibitorů


  • Specifické (většinou spojeny se závažným krvácením)
  • Nespecifické (antifosfolipidové protilátky)
• Specifické inhibitory


  Protilátka produkovaná B lymfocyty a namířená proti určitému koagulačnímu faktoru a inaktivující jeho prokoagulační aktivitu, nejčastěji FVIII
• Typy specifických inhibitorů


  • Inhibitor u hemofilie (protilátka proti léčebně dodávanému FVIII)
  • Získaná hemofilie (autoprotilátka proti vlastnímu FVIII – spontánní vznik)
• Nejčastěji se setkáváme s autoprotilátkami proti FVIII u nemocných s hemofilií A
• Méně vzácné specifické inhibitory

  • FV, FIX
• Vzácné specifické inhibitory


  • FI, FII, FVII, FX, FXI, FXII, FXIII, PC, PS
• Jak zjistíme specifický inhibitor FVIII?

  1. Prodloužené APTT (APTT-R: 2 – 3)

  2. Hodnota PT a TT je normální

  3. Směsný (korekční) test APTT-KOR → nekoriguje se

  4. APTT-actin → nekoriguje se

  5. Stanovení aktivity faktorů chromogenně

  6. Inhibitor screeningově → pozitivní

  7. Inhibitor kvantitativně (Bethesda jednotky)
• KOREKCE = prodloužení se mění v čase!!!
• Inhibitor FVIII screeningově


  1. Specifická protilátka proti FVIII je časově závislá po inkubaci se APTT prodlužuje → APTT-směsný test (PP: NVN) 4:1; 1:1; 1:4

  2. APTT před inkubací -> inkubace 2 hod, 37 °C -> APTT po inkubaci: rozdíl v APTT před a po inkubaci více než 8 vteřin? tak se udělá průkaz přítomnosti inhibitoru → pozitivní → inhibitor přítomen → kvantifikace inhibitoru
• Inhibitor FVIII kvantitativně


  1. Bethesda metoda, Nijmegen modifikace

  2. Zdroj FVIII je normální plazma

  3. Inkubace směsi normální plazmy a pacientské plazmy 1:1, 2 hod, 37 °C → stanovení zbytkové aktivity FVIII

  4. 1 BU (Bethesda jednotka) = množství inhibitoru, které neutralizuje 50 % aktivity faktoru během 2hodinové inkubace při 37 °C
• Laboratorní diagnostika


  • Screening inhibitoru: prodloužené APTT
  • Průkaz inhibitoru: APTT korekční test -> prodloužení test se nekoriguje a uvažujeme o přítomnosti inhibitorů -> konfirmační testy
  • Průkaz specifity inhibitoru: funkční aktivita koag. faktorů: snížená aktivita
  • Kvantifikace inhibitoru Bethesda metodou
• Bethesda metoda


  Měření titru inhibitorů proto KF, nízký titr pod 5 BU/ml; vysoký titr nad 5 BU/ml
• FVIII


  • Má vazbu s vWF -> prodlužuje jeho plazmatický poločas
  • Hemofilie A = vrozený genetický defekt tvorby FVIII
  • Inhibitor nezpůsobí jeho nulovou aktivitu, pouze snížení
  • Projev: náhlé krvácení, ekchymózy, krvácení do svalů
• Nespecifické inhibitory


  • Antifosfolipidové protilátky (APA)
  • Heterogenní skupina protilátek třídy IgG a IgM, které reagují s negativně nabitými fosfolipidy
  • Vazba antifosfolipidových protilátek na fosfolipidy znemožní vytvoření koagulačně nebo inhibičně aktivních komplexů → antikoagulační/prokoagulační projevy
• Lupus antikoagulans


  • Protilátky proti plazmatickým bílkovinám navázaným na antifosfolipidové povrchy
  • Vznik: autoimunitní onemocnění, tumory, infekční onemocnění, gravidita, zdraví lidé
  • Působí proti PL na povrchu
  • APTT prodloužené, nedochází ke korekci normální plazmou (korekční testy) -> konfirmační test -> dochází ke korekci přidáním PL
  • APTT-aktin v normě – fosfolipidy ze sójových bobů