Radio Inmunologie

• Dosage radio-immunologique (DRI)


  Méthode analytique sensible utilisée pour mesurer de très faibles concentrations de substances biologiques, comme les hormones et les protéines spécifiques, dans divers échantillons
• Principe des Dosages Radio-Immunologiques

  1. Marquage Radioactif

  2. Compétition

  3. Méthode Sandwich
• Marquage Radioactif


  L'antigène d'intérêt est marqué avec un isotope radioactif, souvent de l'iode 125𝐼125I, permettant de le détecter facilement dans les réactions
• Compétition


  Dans la méthode compétitive, l'antigène marqué et l'antigène non marqué (l'analyte dans l'échantillon) compétitionnent pour se lier aux sites limités d'un anticorps spécifique. La quantité de l'antigène marqué qui se lie à l'anticorps est inversement proportionnelle à la concentration de l'antigène non marqué
• Méthode Sandwich


  Pour les antigènes possédant plusieurs épitopes, cette méthode utilise deux anticorps. L'antigène est "pris en sandwich" entre un anticorps de capture fixé sur un support solide et un anticorps traceur radioactif. La quantité d'antigène est directement proportionnelle à la radioactivité mesurée
• Mise en Œuvre des Dosages Radio-Immunologiques

  1. Préparation des Réactifs

  2. Incubation

  3. Séparation des Complexes

  4. Mesure de la Radioactivité

  5. Analyse et Interprétation
• Préparation des Réactifs


  Les anticorps doivent être de haute qualité et spécifiques à l'antigène d'intérêt. L'efficacité du marquage radioactif de l'antigène doit également être optimisée
• Incubation


  Les réactifs sont incubés ensemble, permettant aux anticorps de se lier aux antigènes. La durée et les conditions d'incubation doivent être strictement contrôlées
• Séparation des Complexes


  Après incubation, les complexes anticorps-antigènes doivent être séparés des anticorps libres et des antigènes non liés. Des techniques de précipitation ou des colonnes de filtration peuvent être utilisées
• Mesure de la Radioactivité


  La radioactivité des complexes est mesurée à l'aide d'un compteur gamma. Cette mesure reflète la concentration de l'antigène dans l'échantillon
• Analyse et Interprétation


  Les données recueillies sont analysées pour déterminer la concentration de l'antigène. Des courbes d'étalonnage sont utilisées pour interpréter les résultats quantitatifs
• Applications des dosages radio-immunologiques

  • Endocrinologie : Dosage des hormones telles que l'insuline et le cortisol
  • Cancérologie : Mesure des marqueurs tumoraux
  • Recherche en immunologie : Quantification des cytokines et autres médiateurs inflammatoires
• Malgré l'avènement de techniques alternatives moins dépendantes des isotopes radioactifs, les dosages radio-immunologiques restent une méthode de choix pour les analyses nécessitant une grande sensibilité