Biochimie Clinique

• Raisons pour demander une analyse biochimique/biologique :

  • Les résultats sont plus précis et objectifs que les symptômes, l'examen clinique et les dires du patient
• Les analyses biologiques sont importantes pour :

  • Aider au diagnostic
  • Mesurer la progression et l'extension de la maladie
  • Évaluer l'effet du traitement
  • Suivre la stabilité d'une fonction
  • Estimer les facteurs de risque
  • Faire du dépistage chez les sujets "sains"
• Interprétation des résultats :

  • Comparer les résultats aux valeurs de référence
  • Comparer les résultats aux antériorités du patient
  • Tenir compte de :

  1. Renseignements Cliniques
  2. Des variations analytiques
  3. Des variations biologiques
  4. De l'évolution de la maladie
• Importance du Prélèvement : Le prélèvement est une phase cruciale de l'analyse biologique
• Les différentes étapes d'une analyse biochimique :

  1. Phase pré analytique
  2. Phase analytique
  3. Phase post analytique
• L'examen biologique n'est pas seulement une analyse, mais représente un ensemble complexe d'étapes qui, du prélèvement au compte rendu final, nécessite une surveillance permanente
• Les résultats devront être aussi exacts que les techniques modernes le permettent
• Phase pre-analytique:

  • Actes entre la prescription de l'analyse par le médecin et sa réalisation par le laboratoire
  • Comprend:

  1. La préparation du patient
  2. Le choix du moment
  3. L'envoi au laboratoire
  4. L'identification
  5. Le transport
  6. L'enregistrement
• Variables pré-analytiques & fiabilité de l'analyse biologique:

  • 50% des erreurs de diagnostic sont liées aux variables pré-analytiques
  • Conséquences:
  • 11% des patients sont soumis à des thérapies inappropriées
  • 15% des patients sont soumis à des examens supplémentaires inutiles
• Comment maîtriser la phase pré-analytique :

  • Établir des procédures définissant les modes opératoires et leurs champs d'application
  • Suivre le principe : écrire ce qu'on doit faire, faire ce qu'on a écrit et écrire ce qu'on a fait
  • Assurer la traçabilité: «aptitude à retrouver l'historique, l'utilisation ou la localisation d'une entité au moyen d'identification enregistrée»
• Objectif des précautions de la phase pré-analytique : éliminer les causes de non-conformité
• Causes de non-conformité d'un prélèvement :

  • Technique de prélèvement
  • Stase (garrot > 1min --> hyperkaliémie)
  • Volume insuffisant
  • Défaut d'identification de renseignements cliniques
  • Récipient incorrect
  • Site de prélèvement inadapté (sang veineux au lieu d'artériel)
  • Tube cassé
  • Conservation incorrecte (bilirubine doit être conservée à l'abri de la lumière)
  • Erreurs de temps
• Différentes sortes de tubes :

  1. Sans anticoagulant: -> sérum après centrifugation :

  • Tubes secs (bouchon rouge)
  • Tubes avec gel de polymère activant la coagulation (bouchon jaune)

  2. Avec anticoagulant: sang total ou plasma après centrifugation :

  • EDTA (b. violet)
  • Fluorure de Na/oxalate de K (b. gris)
  • Citrate de Na (b. noir ou bleu)
• Pour les urines :

  • Urines fraîches : corps cétoniques, test HLM (Hématies Leucocytes par minute), bilirubine
  • Diurèse de 24 heures : pour tout le reste (le volume utilisé pour une diurèse varie entre 750 et 2000 ml adulte normal)
  • Conservateurs utilisés des urines : acide acétique glacial, acide chlorhydrique, acide borique
• Prélèvement de LCR :

  • Recueilli par ponction lombaire
  • Acte médical
  • Contre-indication formelle à la PL
  • Hypertension intracrânienne (pour écarter une hypertension intracrânienne)
  • Syndrome hémorragique
  • Signes de focalisation
• Phase analytique :

  • Étape technique proprement dite avec tous les éléments du traitement de l'échantillon
  • Une méthode analytique doit être précise, exacte, sensible, spécifique, peu coûteuse, simple et rapide
• Erreurs analytiques :

  • Erreurs aléatoires affectent la précision du processus analytique
  • Erreurs systématiques affectent l‘exactitude du processus analytique
• Précision : l'accord, la similitude entre des mesures répétées sur un même échantillon

  • L'imprécision caractérise la dispersion des valeurs obtenues lors des mesures répétées de ce même échantillon
• Exactitude : l'accord entre la meilleure valeur estimée de la quantité mesurée et la valeur vraie
• Erreurs aléatoires :

  • Caractérisent la dispersion des valeurs obtenues lors des mesures répétées d'un même échantillon
• Erreurs systématiques :

  • Affectent l‘exactitude du processus analytique
  • L'exactitude est l'accord entre la meilleure valeur estimée de la quantité mesurée et la valeur vraie
  • La meilleure valeur estimée peut être la moyenne des résultats de mesures répétées
  • La valeur vraie est la valeur obtenue avec une technique de référence
• Phase post-analytique :

  • Valider les résultats bruts, les analyser dans leur cohérence et les présenter de manière interprétable par le prescripteur
• Interprétation des résultats :

  • La plupart des résultats sont quantitatifs
  • Concentration exprimée en mmol/L, mg/dL ou g/L pour les substrats, UI/L pour les enzymes, KPa ou mm Hg pour les gaz
• Interprétation des résultats :

  • Comparaison avec la valeur attendue chez des individus homologues en bonne santé (valeur de référence)
  • Dépend de la précision de la méthode et de la variabilité biologique chez le patient
  • Compatibilité avec les données cliniques? Chercher des explications pré-analytiques, analytiques et post-analytiques
• Intervalle de référence :

  • Distribution des valeurs obtenues à partir d'une population donnée
  • En général, 95% des valeurs de la population sont retrouvées dans l'intervalle : Moyenne (μ) +/- écart-type (σ)
• Sensibilité, Spécificité :

  • Sensibilité : incidence des résultats positifs chez les patients présentant une pathologie donnée (vrais positifs)
  • Spécificité : incidence des résultats négatifs chez les sujets dépourvus d'une pathologie donnée (vrais négatifs)
• Pour le dépistage, on utilise une méthode hautement sensible (ex : dépistage du cancer du sein avec ELISA)

  • Pour le diagnostic, on utilise une méthode hautement spécifique (ex : si ELISA est positif, on recourt à la mammographie)
• Valeur prédictive positive : probabilité d'une pathologie chez un patient ayant un résultat positif
• Un bon dialogue entre le prescripteur et le biologiste permet d'optimiser l'interprétation et les prescriptions complémentaires
• Méthodes de dépistage du cancer du sein :

  • Test immuno-enzymatique ELISA : méthode hautement sensible
  • Pour le diagnostic, on utilise une méthode hautement spécifique : si le test ELISA est positif, on a recours à la mammographie qui est plus spécifique
• Valeur prédictive positive (VPP) : probabilité de la maladie chez les sujets présentant un test positif (VP/VP+FP)
• Valeur prédictive négative (VPN) : probabilité de l’absence de la maladie chez les sujets présentant un test négatif (VN/VN+FN)
• La VPP d’un test dépend de 3 facteurs :

  • La prévalence de la maladie
  • La sensibilité du test
  • La spécificité du test
• Règles générales pour les prélèvements :

  • Entre 7 h et 9 h le matin
  • 12 h après le dernier repas
  • Avant les soins ou la prise de médicaments
  • Pour le dosage de médicament, prendre en compte les temps de pic sérique et d’établissement d’un état stationnaire
• Causes d’altération d’un échantillon :

  • Métabolisme des cellules rouges
  • Évaporation, sublimation
  • Réactions chimiques
  • Décompositions microbiologiques
  • Processus osmotiques
  • Effet de la lumière
  • Diffusion gazeuse
• Amélioration de la qualité des échantillons :

  • Rapidité des transports
  • Stockage limité
  • Stockage à basse température (sauf exception)
  • Stockage vertical dans des récipients bouchés
  • Les agents de séparation (gels) améliorent les rendements et permettent le stockage dans le tube primaire
  • Éviter de secouer les tubes (risque d’hémolyse)
• Mesures d'hygiène et sécurité pour les prélèvements :

  • Considérer tous les prélèvements comme contaminés
  • Précautions universelles : se laver les mains, manipuler avec soin les objets tranchants et piquants, ne pas récapuchonner les aiguilles, désinfecter ou stériliser les instruments, porter un équipement de protection personnelle adapté
• Les cellules de l’organisme humain baignent dans un milieu salin, dont la composition et le volume sont réglés avec précision
• Trois électrolytes - le sodium, le potassium et le chlorure - jouent un rôle primordial dans la régulation des liquides de l’organisme et leurs études sont inséparables de celle de l’eau
• L’eau est le composé le plus abondant de notre organisme, représentant 55 à 70 % du poids du corps