Tassonomia procarioti

• I bacteria presentano nella parete almeno una molecola glicoproteica ( mureina, peptidoglicano)  costituita da lunghi filamenti polisaccaridici NAM-NAG-NAM-NAG uniti da  ponti peptidici.
• Gli Archea possiedono subunità proteiche unite da pseudopeptidoglicano privo di NAM: la diversa organizzazione della membrana gli permette maggiore stabilità, infatti sono capaci di crescere ad elevate temperature.
• Nei Bacteria sia un secondo strato fosfolipidico, negli Archea i lipidi sono ramificati, altri attraversano la membrana che è quindi parzialmente monostratificata.
• I Crenarchaeota sono termo acido resistenti, hanno forma coccica e sono chemiorganotrofi, ovvero hanno un metabolismo ossidativo in ambiente aerobico e anaerobico che gli consente inoltre di ossidare lo zolfo.
• Gli Euryarchaeota si distinguono in metanobatteri e alofili estremi. 
• I gram positivi sono mesofili, chemio eterotrofi/aerobi/anaerobi facoltativi e vivono in simbiosi con l'uomo o con gli animali e sono patologici o opportunisti.
• Gli stafilococchi sono: 

  • cocchi ammassati
  • senza spore
  • resistenti al calore, uccisi dopo i 60° C
  • resistenti a comuni disinfettanti 
• Possiedono sostanze di natura polisaccaridica o proteica e hanno antigeni:

  •  capsulari: solo nei ceppi con la capsula, di natura polipeptidica
  •  parietali: di natura proteica e polisaccaridica.
  • Lo stafilococcus aureus è costituito da acido teicoico + scheletro di poliribitolo. 
  • Lo stafilococcus epidermidis è costituito da acido teicoico + poliglicerofosfato
• Lo stafilococcus aureus causa patologie infettive e intossicative; lo stafilococcus epidermidis è opportunista. 

  L’aureus è mannitolo fermentante e forma colonie giallo/oro; l'epidermidis non è mannitolo fermentante e le sue colonie risultano bianche.
• Gli stafilococchi sono ossidasi - e degradano glucosio e carboidrati tramite un metabolismo fermentativo. Sono catalasi + e superossidodismutasi +.
• Enzimi Aureus:

  •  catalasi, superossido dismutasi
  •  coagulasi
  •  idroialuronidasi
  •  DNAasi
  •  lipasi
  •  proteasi
• I metanobatteri sono anaerobi stretti che riducono la CO2 a CH4 usando H2 come potere riducente, sono gram positivi e negativi
• Gli alofili estremi riescono a vivere in concentrazioni saline molto elevate fino al 30% e hanno un metabolismo eterotrofo facoltativo: in presenza di ossigeno attuano alla respirazione, in assenza di ossigeno attuano il metabolismo fotoautotrofo.
• Tossine Aureus

  • α emolisina
  •  leucocidine
  •  enterotossine 
• Ricerca aureus.

  Nelle intossicazioni da alimenti si procede con l'esame microscopico Gram e si semina in piastra: 1. Agar sangue, colonie Gialle 2.  terreno Chapman, colonie gialle aureus, colonie bianche epidermidis
• Ricerca aureus.

  Nelle infiammazioni colpisce cute e faringe 
• Identificazione Stafilococco

  •  Lisostafina: enzima (prodotto dallo  stafilococcus stafiloliticus) capace di lisare le cellule di tutti gli altri stafilococchi 
  • Coagulasi: si stempera la colonia in provetta con plasma di coniglio citrato. Coagulo entro due ore= coagulasi +; si procede con la tipizzazione fagica per evidenziare i ceppi più virulenti.
• Terapia Stafilococco.

  Sensibili alla penicillina, cefalosporine e le vancomicine ma possono dar luogo a antibiotico resistenza. Il gene che produce la penicillosi viene veicolato da plasmidi batteriofagi.
• Gli streptococchi sono gram positivi: 

  • forma sferica
  • presenti in coppie o ammassi
  • asporigeni
  • nei terreni di coltura formano catene lunghe in base al contenuto di nutrienti
  • se coltivati in Agar sangue danno luogo a tre tipi di emolisi: α, β, Ƴ
• Streptococchi β-emolitici

  • infezioni sull'uomo
  • colonie circondate da aloni trasparenti: l'azione emolitica è conseguente alla streptolisina O e S
• Streptococchi a-emolitici

  •  colonie alone verdastro per via della trasformazione dell'emoglobina in metaemoglobina (Fe3+)
• Streptococchi y-emolitici

  • non presentano aloni 
• Streptococchi fecali (enterococchi)

  •  ospiti tubo digerente e causano infezioni alle vie urinarie
  •  si trovano in acqua e alimenti
• Streptococchi lattici

  •  si trovano nel latte, vegetali e cibi conservati
  •  sono impiegati per la fermentazione lattica in latte e formaggi
• Streptococchi gruppo A (emolitici)

   possono formare:

  • colonie mucose: da ceppi capsulati; sono brillanti per l'abbondante gel formato da acido ialuronico
  • colonie  opache: colonie mucose essiccate per via della disidratazione del gel
  • colonie lucide: costituite da cellule che non producono acido ialuronico
• Gli Streptococchi sono ossidasi - e catalasi -. Alcune specie richiedono elevata concentrazione di CO2, altre ambiente strettamente anaerobio.
• Se inglobati da fagociti, gli streptococchi resistono agli enzimi idrolitici per via della presenza di acido ialuronico e della proteina M nella capsula.
• Antigeni extracellulari gruppo a Streptococcus

  • Eritrotossina: di natura proteica con azione esantematica. Prodotta da streptococchi lisogeni e anche dai gruppi C e G.
  • Streptolisine:
  • S: stabile all'aria; responsabile dell'azione leucotossica
  • O: inattiva all'ossigeno; azione eritrotossica e danneggia anche macrofagi e leucociti 
  • NADasi: enzimi che liberano NAD
• Antigeni extracellulari gruppo a Streptococcus

  • DNAasi: degradano DNA
  • Proteasi: distrugge il fattore di patogenicità come la proteina M
  • Streptochinasi: lisa e coaguli sanguigni umani; catalizza la trasformazione del plasminogeno in plasmina; favorisce la diffusione degli streptococchi nei tessuti
  • Ialuronidasi: azione litica e aiuta la diffusione degli streptococchi nei tessuti animali 
• Streptococcus pyogenes;  B-emolitico gruppo A

  Causa: faringite con o senza scarlattina e complicanze suppurative/non suppurative 

  • complicanze suppurative: otite tonsillite meningite peritonite sepsi linfoadeniti polmoniti
  • complicanze non suppurative: glomerulonefrite acuta, malattia reumatica, eritema nodoso
• Complicanze non suppurative: 

  • glomerulonefrite acuta: i sintomi sono ematuria, edema e ipertensione che compaiono in meno di una settimana dall'infezione, localizzata in cute o faringe (si ipotizza sia malattia autoimmune)
  • malattia reumatica: causata da qualsiasi streptococco di gruppo A, i sintomi compaiono dopo 2-3 settimane 
• Ricerca Streptococco

  Test microscopico con Gram dove si presentano catenelle. In Agar sangue e in agar azide sodica, contenente un  inibente ad altri batteri, oppure in Agar sangue azide sodica che evidenzia l'azione emolitica:

  • b-emo: alone chiaro
  • a-emo: alone verde
  • y-emo: no emolisi
• Identificazione streptococco

  si fanno delle prove sierologiche per determinare il gruppo

  Test della bacitracina:

  • disco su Agar sangue → netto alone inibizione= B-emolitico gruppo A 

  Test Ottochina per differenziare gli a-emolitici dagli Streptococcus pneumoniae:

  • alone di inibizione nello Streptococcus pneumoniae 
  • nessun alone sugli a-emolitici
• Streptococcus pneumoniae

  gram +,  forma lanceolata e disposizione a coppia,  asporigeno e immobile; i  ceppi capsulati sono evidenziati con l’ottochina. Hanno metabolismo molto esigente e attuano la fermentazione lattica
• Streptococcus pneumonia

  • Ceppi acapsulati:  colonie piccole e rugose
  • Ceppi capsulati: colonie rotonde e lisce
• Esistono 80 tipi di pneumococco:

  • proteina M,  antigeni somatici simili a quelli dello Streptococco emolitico
  • polisaccaride C, diverso da quello degli streptococchi
  • antigene R, presente nei pneumococchi in fase rugosa 
• Identificazione pneumococco:

  • semina Agar sangue →  aloni a-emolisi (verdi) 
  • Sensibilità ottochina:  distingue gli pneumonia (alone inibizione) dagli a- emolitici (no alone)
• Enterococchi

   bastoncellari, asporigeni, mobili/ immobili, chemiorganotrofi:

  •  glucosio per via fermentativa acido mista e produce:  acido acetico, CO2, H2, acido lattico
  • Nitriti riduzione a nitrati 

  Sono catalasi + e ossidasi -, il che li rende aerotolleranti
• Test eseguiti sugli enterococchi:

  •  fermentazione carboidrati
  •  uso citrato
  •  fermentazione lattosio; 1.  latt. fermentante → E. coli, Klebsiella

                                          2. no latt. ferm →  Salmonella, Shigella
• Esistono 41 generi di enterococchi:

  • opportunisti: E. coli, Klebsiella, Proteus 
  • patogeni: Salmonella, Shigella